Title
Efekat mezenhimalnih matičnih ćelija na oštećenje jetre uzrokovano aktivacijom NKT ćelija
Creator
Gazdić, Marina M., 1987-
Copyright date
2017
Object Links
Select license
Autorstvo-Nekomercijalno-Bez prerade 3.0 Srbija (CC BY-NC-ND 3.0)
License description
Dozvoljavate samo preuzimanje i distribuciju dela, ako/dok se pravilno naznačava ime autora, bez ikakvih promena dela i bez prava komercijalnog korišćenja dela. Ova licenca je najstroža CC licenca. Osnovni opis Licence: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/rs/deed.sr_LATN. Sadržaj ugovora u celini: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/rs/legalcode.sr-Latn
Language
Serbian
Cobiss-ID
Inventory ID
D-3128
Theses Type
Doktorska disertacija
description
Datum odbrane: 15.12.2017.
Other responsibilities
mentor
Volarević, Vladislav, 1979-
predsednik komisije
Lukić, Miodrag, 1941-
član komisije
Arsenijević, Nebojša, 1958-
član komisije
Stojković, Miodrag, 1964-
član komisije
Bumbaširević, Vladimir, 1951-
član komisije
Trajković, Vladimir, 1967-
Academic Expertise
Medicinske nauke
University
Univerzitet u Kragujevcu
Faculty
Fakultet medicinskih nauka
Alternative title
Mesenchymal stem cells-mediated modulation of NKT cell-dependent liver injury
Publisher
[М. М. Gazdić]
Format
IV, 156 listova
Abstract (sr)
Mezenhimalne matične ćelije (engl. mesenchymal stem cells, MSCs) se zbog svojih imunomodulatornih karakteristika smatraju potencijalnim terapijskim sredstvom za lečenje fulminantnog hepatitisa. Međutim, efekat MSCs na fenotip i funcije urođenoubilačkih T limfocita (engl. natural killer T cells, NKT), glavnih efektorskih ćelija u ovoj bolesti još uvek nije poznat.
Kako bi se ispitao uticaj MSCs na hepatotoksičnost NKT ćelija, u ovom istaživanju su korišćeni modeli akutnog oštećenja jetre koji su C57Bl/6 miševima indukovani aplikacijom konkanavalina A (engl. concanavalin A, ConA) odnosno α-galaktoceramida (engl. α-galactosylceramide, α-GalCer). Biohemijski testovi i kvantitativna histologija su ukazali da MSCs značajno redukuju akutno oštećenje hepatocita izazvano primenom Con A ili α-GalCer-a, što je u korelaciji sa smanjenom zastupljenošću inflamacijskih NKT ćelija (TNF-α-, IFN-γ-, T-bet+ CD4+ i CD1d tetramer+ kao i GATA3+, IL-4+ NKT ćelija) u jetri i smanjenom koncentracijom TNF-α, IFN-γ i IL-4 u serumu miševa sa hepatitisom. MSCs su suprimirale produkciju TNF-α, IFN-γ i IL-4, a povećavale produkciju imunosupresivnog IL-10 u α-GalCer-om stimulisanim NKT ćelijama jetre, ex vivo. Aplikacija MSCs smanjila je ekspresiju FASL, CD107 i TRAIL na NKT ćelijama jetre, i sledstveno, smanjila citotoksičku aktivnost NKT ćelija prema hepatocitima in vitro. Primena 1-metil triptofana, farmakološkog inhibitora indolamin 2, 3-dioksigenaze (engl. indolamine 2,3-dyoxigenase, IDO) i L-monometil arginin citrata, specifičnog inhibitora inducibilne azot oksid sintaze (engl. inducible nitric oxide synthase, iNOS) ukinula je hepatoprotektivni efekat kondicioniranog medijuma generisanog od MSCs, kao i imunomodulatorno dejstvo MSCs na NKT ćelije in vitro. IDO i iNOS su glavni medijatori kojim su humane MSCs suprimirale efektorske funkcije α-GalCer-om stimulisanih humanih mononuklearnih ćelija periferne krvi.
Najvažniji zaključak ove disertacije je da MSCs katalitičkom aktivnošću enzima IDO i iNOS, suprimiraju citotoksičnost i produkciju inflamacijskih citokina u NKT ćelijama u jetri i redukuju oštećenje hepatocita.
Abstract (en)
Mesenchymal stem cells (MSCs) are, due to immunomodulatory characteristics, considered as novel agents in the treatment of immune-mediated acute liver failure. Howeer, the effects of MSCs on phenotype and function of natural killer T (NKT) cells, major effector cells in fulminant hepatitis, is not understood. We used concanavalin A (ConA) - and α-galactosylceramide (α-GalCer)-induced liver injury to evaluate effects of MSCs on NKT-dependent hepatotoxicity. Mouse MSCs (mMSCs) significantly reduced Con A- and α-GalCer-mediated hepatitis in C57Bl/6 mice, as demonstrated by histopathological and biochemical analysis, attenuated influx of inflammatory (T-bet+ TNF-α, IFN-γ producing and GATA3+, IL-4-producing) liver NKT cells and down-regulated TNF-α, IFN-γ and IL-4 levels in the sera. The liver NKT cells cultured in vitro with mMSCs produced lower amounts of inflammatory cytokines (TNF-α, IFN-γ, IL-4) and higher amounts of immunosuppressive IL-10 upon α-GalCer stimulation. mMSC treatment attenuated expression of apoptosis-inducing ligands (FASL, CD107 and TRAIL) on liver NKT cells and suppressed the expression of pro-apoptotic genes in the livers of α-GalCer-treated mice. mMSCs reduced cytotoxicity of liver NKT cells against hepatocytes in vitro. The presence of 1-methyl-DL-tryptophan, a specific inhibitor of indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) or L-NG-monomethyl Arginine citrate, specific inhibitor of inducible nitric oxide synthase (iNOS), in mMSC-conditioned medium injected to α-GalCer-treated mice, counteracted the hepatoprotective effect of mMSCs in vivo, and restored pro-inflammatory cytokine production and cytotoxicity of NKT cells in vitro. Human MSCs in iNOS and IDO-dependent manner, attenuated the production of inflammatory cytokines in α-GalCer-stimulated human peripheral blood mononuclear cells and reduced their cytotoxicity against HepG2 cells. In conclusion, MSCs protect from acute liver injury by attenuating cytotoxicity and capacity of liver NKT cells to produce inflammatory cytokines in iNOS and IDO dependent manner.
Authors Key words
Mezenhimalne matične ćelije; NKT ćelije; imunosupresija; akutno oštećenje jetre
Authors Key words
Mesenchymal stem cells; NKT cells; Immunosuppression; Acute liver injury
Classification
577.27:616-097(043.3)
Subject
Mezenhimalne matične ćelije
Type
Tekst
Abstract (sr)
Mezenhimalne matične ćelije (engl. mesenchymal stem cells, MSCs) se zbog svojih imunomodulatornih karakteristika smatraju potencijalnim terapijskim sredstvom za lečenje fulminantnog hepatitisa. Međutim, efekat MSCs na fenotip i funcije urođenoubilačkih T limfocita (engl. natural killer T cells, NKT), glavnih efektorskih ćelija u ovoj bolesti još uvek nije poznat.
Kako bi se ispitao uticaj MSCs na hepatotoksičnost NKT ćelija, u ovom istaživanju su korišćeni modeli akutnog oštećenja jetre koji su C57Bl/6 miševima indukovani aplikacijom konkanavalina A (engl. concanavalin A, ConA) odnosno α-galaktoceramida (engl. α-galactosylceramide, α-GalCer). Biohemijski testovi i kvantitativna histologija su ukazali da MSCs značajno redukuju akutno oštećenje hepatocita izazvano primenom Con A ili α-GalCer-a, što je u korelaciji sa smanjenom zastupljenošću inflamacijskih NKT ćelija (TNF-α-, IFN-γ-, T-bet+ CD4+ i CD1d tetramer+ kao i GATA3+, IL-4+ NKT ćelija) u jetri i smanjenom koncentracijom TNF-α, IFN-γ i IL-4 u serumu miševa sa hepatitisom. MSCs su suprimirale produkciju TNF-α, IFN-γ i IL-4, a povećavale produkciju imunosupresivnog IL-10 u α-GalCer-om stimulisanim NKT ćelijama jetre, ex vivo. Aplikacija MSCs smanjila je ekspresiju FASL, CD107 i TRAIL na NKT ćelijama jetre, i sledstveno, smanjila citotoksičku aktivnost NKT ćelija prema hepatocitima in vitro. Primena 1-metil triptofana, farmakološkog inhibitora indolamin 2, 3-dioksigenaze (engl. indolamine 2,3-dyoxigenase, IDO) i L-monometil arginin citrata, specifičnog inhibitora inducibilne azot oksid sintaze (engl. inducible nitric oxide synthase, iNOS) ukinula je hepatoprotektivni efekat kondicioniranog medijuma generisanog od MSCs, kao i imunomodulatorno dejstvo MSCs na NKT ćelije in vitro. IDO i iNOS su glavni medijatori kojim su humane MSCs suprimirale efektorske funkcije α-GalCer-om stimulisanih humanih mononuklearnih ćelija periferne krvi.
Najvažniji zaključak ove disertacije je da MSCs katalitičkom aktivnošću enzima IDO i iNOS, suprimiraju citotoksičnost i produkciju inflamacijskih citokina u NKT ćelijama u jetri i redukuju oštećenje hepatocita.
“Data exchange” service offers individual users metadata transfer in several different formats. Citation formats are offered for transfers in texts as for the transfer into internet pages. Citation formats include permanent links that guarantee access to cited sources. For use are commonly structured metadata schemes : Dublin Core xml and ETUB-MS xml, local adaptation of international ETD-MS scheme intended for use in academic documents.